В конце 60-х — начале 70-х гг. в большинстве работ, посвященных функ-ционированию макрофагов, использовалась модель иммуногенности макрофагов in vivo. Макрофаги инкубировали с радиоактивно меченным антигеном (например, с 1311-гемоцианином) и через разное время после инкубации вводили син-генным реципиентам, исследуя их способность индуцировать синтез антител [44, 45]. Часть макрофагов инкубировали in vitro, и через разное время определяли количество 1311-меченого антигена, остающегося в клетках или выделяемого в среду. Антигены вначале связывались с клеточной поверхностью, а затем поглощались в составе мембранных пузырьков и быстро подвергались катаболизму. Около 80% антигена, первоначально связавшегося с клеткой, деградировало; большая часть катаболизированного антигена позднее обнаруживалась в культуральной среде в виде 1311-аминокислот (табл. 5.6). В то же время оставшиеся 20% связанного клетками антигена избегали первоначальной дегра-дации и оставались ассоциированными с кле ...

Монослой макрофагов, полученных из различных лимфоидных органов или из перитонеального экссудата, связывает тимоциты в значительно большей степени, чем полиморфно-ядерные лейкоциты или фибробласты. Лимфоциты из лимфатических узлов или перитонеального экссудата прикрепляются к моно-слою макрофагов в значительно большем количестве, чем ксеногенные тимоциты или лимфоциты [68]. Таким образом, по-видимому, существует некоторая специфичность взаимодействия, возможно указывающая на существование неких клеточных механизмов распознавания. Не было обнаружено никакой избирательности по отношению к В- и Т-лимфоцитам: они связывались с макрофагами пропорционально их содержанию в популяции лимфоцитов. Изменение поверхностных lg В-лимфоцитов не подавляло связывания; не было обнаружено также конкурентного угнетения связывания избытком lg.

Для антигеннезависимого взаимодействия макрофагов с лимфоцитами тре-бовались живые макрофаги, в то время как роль лимфоцитов была настолько пасси ...

Разработка воспроизводимых и надежных методов оценки антиген-специ-фической активации Т-клеток позволила провести аналогичные исследования in vitro. Как и раньше, поглощение белковых антигенов макрофагами определяли с помощью радиоактивных изотопов, а иммуногенность оценивали по способности инкубированных с антигеном макрофагов активировать пролифе-рацию иммунных Т-клеток in vitro. Хотя результаты исследований in vivo и in vitro в целом были сходны, обнаружился также и ряд отличий, частично изменивших наши представления о процессинге антигена в макрофагах.

Макрофаги, инкубированные с растворимыми белковыми антигенами in vitro, накапливали иммунологически активный антиген по двухступенчатому механизму [48]. Первый этап включал связывание молекул антигена с поверх-ностью макрофагов; этот этап не зависел от температуры. Потенциальная имму-ногенность молекул антигена, связавшихся с поверхностью макрофагов во вре-мя инкубации при 4° С, полностью подавлялась трипсинизацией ма ...

Поскольку митогены в отличие от растворимых белковых антигенов могут прочно связываться с поверхностью реагирующих Т-клеток, естественно предположить, что эти агенты способны активировать Т-клетки без участия вспомoгательных клеток. Хотя множество ранних исследований показывало, что лимфоциты, освобожденные от макрофагов, полностью сохраняют способностьотвечать на митогены, сейчас уже есть основания думать, что это объяснялось, по всей видимости, неполным удалением макрофагов. Левис и Робине 122]первыми показали, что бластогенный ответ человеческих клеток на различные дозы фитогемагглютинина (ФГА) заметно снижается после удаления прикрепляющихся клеток с помощью двухступенчатой процедуры, включающей пропускание через колонку с найлоновой ватой и последующую инкубацию на большой стеклянной поверхности. Пролиферативный ответ восстанавливался после добавления аутологичных или аллогенных макрофагов. Эти исследования были продолжены на морских свинках [23]. Клетки лимфатических узлов очи ...

По данным нескольких исследовательских групп, антитела к растворимым белковым антигенам не подавляют реакции Т-клеток на инкубированные с анти-геном макрофаги. Ранее мы приводили такие же результаты для ДНФ-АМС. В сущности, это весьма загадочный результат, свидетельствующий о том, как мало мы знаем о механизмах процессинга растворимых белковых антигенов в макрофагах и презентации антигенов Т-клеткам. Тому, что антитела к антигену не подавляют ни пролиферации Т-клеток, ни их прикрепления к монослою инкубированных с антигеном макрофагов, было предложено множество объяс-нений. Весьма интересно рассмотреть эти предложения подробно, поскольку при этом станет ясно, что известно и что неизвестно о механизме процессинга антигена.

Наиболее простое объяснение аналогично тому, которое предлагалось для объяснения нечувствительности инкубированных с антигеном макрофагов к трипсину. Предполагается, что важные в иммунологическом отношении моле-кулы антигена находятся в участках клетки ...

Несколько популяций тканевых макрофагов, потомков мононуклеарных фагоцитов, также были охарактеризованы по поверхностным маркерам и био-логическим функциям. В гранулемах обычно обнаруживаются эпителиоидные клетки, которые, по-видимому, образуются из моноцитов крови, активирован-ных в ходе иммунного ответа на чужеродный антиген, например при кожной реакции гиперчувствительности замедленного типа. Эпителиоидные клетки обладают многими морфологическими признаками макрофагов и несут рецеп-торы Fc и СЗ. В целом они обладают меньшей фагоцитирующей активностью, чем макрофаги. Другой тип клеток, многоядерные гигантские клетки, обра-зуются, по всей видимости, за счет слияния макрофагов, а не за счет деления ядер в отсутствие цитоплазматического деления. Были идентифицированы два типа таких клеток: клетки Ланганса с относительно небольшим числом ядер на периферии цитоплазмы, и клетки типа инородного тела, у которых множество ядер распределено по всей цитоплазме. Судьба моноцитов, проникающих в ...

Исследовали влияние антигена на взаимодействие макрофагов с иммунными лимфоцитами [70]. Для этого монослойные культуры прикрепленных к стеклу макрофагов инкубировали с растворимыми антигенами в течение 60 мин при 37° С, отмывали, а затем инкубировали с примированными Т-лимфоцитами. В этих опытах лимфоциты получали из лимфатических узлов морских свинок, иммунизированных растворимыми антигенами в полном адъюванте Фрейнда. Клетки пропускали через адгезивные колонки с найлоновой ватой и стеклян-ными шариками для того, чтобы удалить макрофаги и В-клетки. Как это ни удивительно, эффективность взаимодействия макрофагов с лимфоцитами в пер-вый час совместной инкубации не зависела от присутствия антигена (рис. 5.3). Однако если время инкубации увеличивали, то разница в связывании лимфо-цитов с несущими антиген и контрольными макрофагами становилась заметной. Существенная разница в связывании Т-лимфоцитов с контрольными макрофа-гами и макрофагами, инкубированными с антигеном, наблюдалась через 6 ...

Макрофаги секретируют множество различных продуктов (табл. 5.23) и в этом отношении могут соперничать даже с гепатоцитами [95]. К наиболее важным продуктам секреции макрофагов относятся протеиназы, активирую-щиеся при нейтральных значениях рН. Активатор плазминогена катализирует образование плазмина из фиброгена, а коллагеназа и эластаза, две другие важные нейтральные протеиназы, разрушают компоненты стенок сосудов, окружающие сосуды ткани и поверхности суставов. Продукты расщепления комплемента и деградации коллагена вызывают хемотаксис макрофагов. Таким образом, активность нейтральных протеиназ может способствовать дальнейше-му скоплению мононуклеарных фагоцитов. Макрофаги, однако, секретируют также а-2-макроглобулин, ингибитор плазмина и активатор плазминогена, коллагеназу, эластазу и калликреин. Комплекс этих ферментов с ингибитором присоединяется к рецепторам на поверхности макрофагов, поглощается и раз-рушается. Секреция нейтральных протеиназ индуцируется рядом агенто ...

Другая группа клеток, включающая клетки Лангерганса в коже, вуалевые клетки в афферентной лимфе и отростчатые клетки ретикулума в лимфоузлах, не обладает фагоцитарной активностью и поэтому не может быть с уверенностью отнесена к дифференцировочному ряду мононуклеарных фагоцитов. Однако, как будет ясно из последующего изложения, эти клетки имеют много общих свойств, указывающих на их тесное родство. Весьма вероятен следующий путь i образования этих клеток: моноциты крови ->- клетки Лангерганса в эпидермисе - вуалевые клетки в афферентной лимфе -У всех исследованных видов животных клетки Лангерганса — это един-ственные клетки эпидермиса, несущие рецепторы Fc-IgG, рецепторы G3 и экс-прессирующие антигены 1а [3]. Кроме того, у клеток Лангерганса нет ассоциированных с мембраной поверхностных иммуноглобулинов и маркеров Т-клетокг так что маловероятно их В-клеточное или Т-клеточное происхождение. Клетки Лангерганса имеют морфологию дендритных клеток, светлую цитоплазму и ядро с мелкими лопа ...

Более прямой подход к анализу переработки антигена в макрофагах заключается в исследовании растворимых антиген-специфических факторов, выделяемых макрофагами, инкубированными с антигеном. Прежде чем перейти к обсуждению полученных при этом результатов, следует указать, что такие факторы очень трудно выделить и почти все приводимые данные были получены всего лишь в нескольких лабораториях. Кроме того, трудно примирить существование этих факторов, свидетельствующих о том, что макрофагам и Т-клеткам не обязательно непосредственно взаимодействовать друг с другом, с большой группой данных, которые мы обсудим позднее, показывающих, что большинство функциональных субпопуляций Т-клеток взаимодействует с макрофагами при прямом физическом контакте.
Первыми растворимые продукты макрофагов, участвующие в активации Т-клеток, обнаружили Эрб и Фельдман [63—65] (табл. 5.16). Они заметили, что

при индукции хелперных Т-клеток необязателен прямой контакт между Т-клетками и ма ...